普通注意事項(xiàng):
1.原則上樣品越少,越容易消化,但樣品越少,計(jì)量的誤差可能性也越大,所以控制到蛋白質(zhì)含量為0.10g左右,加入0.2g硫酸銅、3g硫酸鉀及20ml濃硫酸應(yīng)是比較合理的消化方法。
2.消化過(guò)程中,液化較完全時(shí)可以搖動(dòng)一次,把所有的黑色物質(zhì)搖洗下來(lái),搖動(dòng)方法是取下漏斗,戴上棉手套,用手掌緊握瓶頸,由前向側(cè)后甩,液體的狀態(tài)是半旋轉(zhuǎn)半振蕩,注意控制力度不要讓液體濺離瓶口
3.變色時(shí)因?yàn)槭蔷徛兩钥梢詢煞N方法計(jì)時(shí),一是完全變色后半小時(shí)即停止消化,二是剛變色后一個(gè)小時(shí)停止消化。
4.消化液完全冷卻后才能加水、轉(zhuǎn)移、定容,這三個(gè)步驟都會(huì)導(dǎo)致發(fā)熱,所以必須確保水溶液最后在定容到刻度時(shí)冷卻到室溫,當(dāng)然要多次洗滌凱氏燒瓶(即凱氏定氮瓶)以確定轉(zhuǎn)移完全。
5.消化液最好不要放置過(guò)液,需要過(guò)夜測(cè)定時(shí),請(qǐng)先轉(zhuǎn)移定容好消化液。定容好的消化夜也不能放置時(shí)間太久(如幾天)才進(jìn)行蒸餾滴定。
6.蒸餾時(shí),加樣液過(guò)程可以從容操作,但是加堿后,必須緊密有序,堿的流入過(guò)程應(yīng)是充滿整個(gè)漏斗口的,在堿還沒(méi)有放完時(shí)就應(yīng)準(zhǔn)備好加水以封住漏斗口,確保蒸發(fā)器中已有氨從漏斗口泄漏,而導(dǎo)致結(jié)果偏低。
7.加入的氫氧化鈉溶液除與硫酸銨作用外,還與消化液中的硫酸和硫酸銅作用,若加入的氫氧化鈉不夠,則溶液呈藍(lán)色,不生成褐色的氫氧化銅沉淀。所以,加入的氫氧化鈉必須過(guò)量,并且動(dòng)作還要迅速,以防止氨的流失。
8.凱氏定氮儀停止蒸餾時(shí),由于反應(yīng)室外層的壓力突然降低,可使液體倒吸入反應(yīng)室外層,所以,操作時(shí),應(yīng)先將冷凝管下端提高液面并清洗管口,再蒸一分鐘后關(guān)掉熱源。蒸餾是否完全,可用精密PH試紙測(cè)冷凝管口的冷凝液來(lái)測(cè)定,中性則說(shuō)明已蒸餾完全。
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